fa طراحی روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم برای سنجش پادتن های ضد سیتوپلاسم نوتروفیل عمومى General تحقيقي Original Articles پادتن های ضد سیتوپلاسم نوتروفیل (ANCA) رده ای از پادتن ها یا خود پادتن(نو آنتی بادی) ها هستند که معمولا در شرایطی که تخریب نوتروفیل ها در بدن ایجاد می شود، به وجود آمده، منجر به آسیب عروقی می شوند و بروزشان در بعضی از بیماری های روماتیسمی مثل آرتریت روماتوئید (R.A)، لوپوس (SLE) و بیماری های وسکولیتی مثل گرانولوماتوزوگنر (W.G) شایع تر است. از آنجا که تست غربالی برای تعیین ANCA روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم (IFA) می باشد و همچنین به علت حساسیت بالای روش ایمونوفلورسانس و سادگی و قیمت مناسبش نسبت به سایر تست های الیزا و رادیوایمنواسی (RIA)، تصمیم گرفتیم که روش IFA-ANCA را انتخاب کنیم. روش کار شامل جدا سازی نوتروفیل ها از خون اشخاص سالم، سپس تثبیت کردن با محلول اتانل 96 درصد، فرمالین 0.5 درصد، همراه با بهینه سازی کنترل کیفیت روش می باشد. به این منظور تعداد 44 نفر از بین مبتلایان به بیماری های روماتیسمی و وسکولیتی که تست ANCA در آنها مثبت بود، به روش نمونه گیری غیر احتمالی و آسان، انتخاب شدند. بر این اساس با استفاده از روش IFA، دو الگوی رنگ پذیری به نام های فرم C-ANCA یا نوع سیتوپلاسمی و فرم P-ANCA یا حاشیه هسته ای مشاهده گردید. ضمنا این روش، نسبت به روش Lnter assay از تکرار پذیری 95 درصد و دقت 91 درصد برخوردار بوده است. ANCA are classes of antibodies or in reality autoantibodies usually produce in conditions that degradation of neutrophiles occurs. This is led to vascular damage. They are more common in rheumatic diseases such as Rheumatoid Arthritis (RA), systemic Lupus Erythematus (SLE) and vasculitic diseases especially Wegners’ granulomatosis (With specificity and sensitivity as high as 95%). We decided to design IFA-ANCA because this assay has high sensitivity and in with comparison other techniques such as ELISA & RIA is more economic and simple. On the other hand, screening test for determining ANCA is immunofluorescent assay. ANCA test establishment contains: Isolation of neutrophiles, fixation with Ethanol and Formalin, improvement of method and quality control by using of indirect immunofluorescence assay (IFA), 2 staining pattern are observed. Cytoplasmic (C-ANCA) or classic and prinuclear (P-ANCA) pattern. Established ANCA test by inter assay method had 95% reproducibility and 91% precision. پادتن های ضد سیتوپلاسم نوتروفیل, ایمونوفلورسانس غیر مستقیم ANCA, IFA 12 18 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-128&slc_lang=fa&sid=1 M.Saeedi (M.Sc) محسن سعیدی 5900319475328460048788 5900319475328460048788 Yes H . Baradaran (Ph .D) حسن برادران 5900319475328460048789 5900319475328460048789 No M.A Hatef (M.D) محمدرضا هاتف 5900319475328460048790 5900319475328460048790 No